Szczegółowe wyjaśnienie ulotki odczynników w eksperymentach PCR

Szczegółowe wyjaśnienie ulatniania odczynnika w eksperymentach PCR.

W eksperymencie PCR, po dodaniu systemu reakcyjnego, ostrożnie pokrywamy pokrywkę i wielokrotnie potwierdzamy, że pokrywka jest zamknięta, aby uniknąć ulotki odczynnika. Ale czasami mamy również wątpliwości: potwierdziliśmy, że pokrywka jest szczelnie zamknięta, ale po zakończeniu eksperymentu odczynnik nadal będzie odparował. jaki jest powód?

W rzeczywistości ulotność odczynnika jest jednym z najczęstszych problemów w eksperymentach PCR i istnieje wiele czynników wpływających na ulotność odczynnika.

Parowanie odnosi się do tego podczas eksperymentu PCR roztwór reakcyjny odparowuje w wysokiej temperaturze, a następnie skrapla się na ścianie butelki lub górnej osłonie, aby utworzyć mgły wodne lub kropelki wody lub bezpośrednio przepełnia się od szczeliny powietrznej czapki lub warstwy, w wyniku czego powstały w zmianie stężenia roztworu reakcyjnego. Zmiany, ilość roztworu reakcyjnego zmniejszyła się, a niektóre nawet odparowały do ​​suchości, co spowodowało nieprawidłowe eksperymenty.

1. Ciśnienie na gorąco pokrywy, temperatura

W eksperymentach PCR zwykle podgrzewamy pokrywkę, aby zapobiec kondensacji pary odczynnika. Temperatura podgrzewanej pokrywki jest zwykle wyższa niż w roztworze reakcyjnym, aby zapobiec kondensacji oparów.

Cykler termicznych pokrywek ogrzewania można z grubsza podzielić na następujące cztery typy: niezgodne z przepisami pokrywki, regulowane pokrywki grzewcze, adaptacyjne pokrywki grzewcze i automatyczne pokrywki grzewcze. Regulowana podgrzewana pokrywka ma szczelną kompresję. Jeśli nie zostaną zaostrzone, odczynniki odparują. Parowanie krawędzi można zminimalizować, zwiększając ciśnienie na podgrzewanej pokrywce. Czasami wyprzedzenie może ścisnąć rurkę i skręcić gałkę. W normalnych okolicznościach elektryczna inteligentna pokrywa ogrzewania może automatycznie wykrywać materiały eksploatacyjne o różnych wysokościach, automatycznie kompresować materiały ekspresowe, a ciśnienie jest jednolite i stałe, zmniejszając w ten sposób odparowanie odczynnika i błędy ręczne oraz poprawiając dokładność eksperymentalną i powtarzalność.

2. Deformacja materiałów eksploatacyjnych

W przypadku wycieków parowych większość ludzi uważa, że ​​nacisk na gorącą pokrywkę nie wystarczy. Presja gorącej pokrywki jest bardzo ważna, ale to tylko jeden aspekt. W rzeczywistości materiały eksploatacyjne są również bardzo ważne.

Płytki kryzy PCR są zwykle wykonane z materiałów z tworzyw sztucznych, które znacznie się rozwijają i deformują po podgrzaniu. Szybkość rozszerzalności termicznej podstawy metalowej PCR stosowanej do umieszczania płyty otworu PCR jest wyjątkowo niska, a płyta kryzy PCR nie może normalnie rozszerzać się wzdłuż płaszczyzny po rozszerzeniu termicznym. Stan wybrzuszający sprawia, że ​​górna pokrywa ciepła nie jest w stanie w pełni skontaktować się z powierzchnią płyty otworu PCR, powodując nierównomierną temperaturę i ciśnienie, powodując odparowanie odczynnika na krawędzi płyty kryzy PCR i wpływając na efekt wykrywania PCR.

3. Materiały eksploatacyjne nie są szczelnie zamknięte

Szczepliwość pokrywki termicznej i materiałów eksploatacyjnych nie oznacza, że ​​czapka rurki PCR jest szczelnie zamknięta, a jakość studni PCR jest nierówna. Wysokiej jakości materiały eksploatacyjne, powierzchnia dyszy i pokrywy są gładkie, a uszczelka za pokrywą pudełkową jest dobra i nie jest łatwa do wycieku. Niższe materiały eksploatacyjne mają nierówne wyrzuty i linie promieniowe, które mogą łatwo powodować wyciek, a nawet wysuszyć.

Dlatego w eksperymentach PCR staraj się wybrać wysokiej jakości i odpowiednie materiały eksploatacyjne. Jednocześnie system reakcyjny można rozszerzyć, aby zminimalizować wpływ odparowania układu na reakcję.