Problemy z uszczelnieniem i zanieczyszczeniem w wielobornych płytkach hodowli komórkowej

Ładowanie i obsługa wieloosobowych płyt hodowli komórkowej:

Płyta hodowli komórkowej jest również zgodna z zasadą ścisłej ASEPSI podczas wykonywania operacji komórkowych. Wszystkie operacje muszą być znormalizowane i naukowe i nie będą powodować dodatkowego wpływu na wzrost komórek. Najczęstszym problemem jest zapewnienie jednolitości komórek po dodaniu próbki i zminimalizowania wpływu zmiany pożywki na stan wzrostu komórek.

zapytać:
Pokryty 96 i 24-studzienkowych płyt hodowlanych lub naczyń Petriego są bardzo luźne, co jest wygodne do wentylacji, ale czy również wślizgną się bakterie, pleśń i inne zanieczyszczenia?

odpowiedź:
Pokrywa jest bardzo luźna, która należy do kultury pół-otwartej, a celem tego jest wentylacja (w rzeczywistości jest to, że CO2 poza daniem kulturowym jest w pełni wymieniony z naczyniem kulturowym i utrzymanie wartości pH kultury średni).
Wszystko ma zalety i wady, co oczywiście zwiększa możliwość zanieczyszczenia. Ponadto powoduje to, że płyn w naczyniu odparowuje, co jest godne uwagi do precyzyjnego dawkowania leków. Dlatego konieczne są następujące dwa miary: Powietrze w inkubatorze musi być czyste (zwykłe światło ultrafioletowe, szorowanie alkoholu i inkubator powinien być otwarty i zamknięty jak najmniej) b. Wilgotność w inkubatorze musi być zawsze utrzymywana na poziomie 100% (zlew ze sterylną wodą destylowaną umieszczoną w inkubatorze).
Podobnie jak danie Petriego, jest to również pojemnik z odwróconą pokrywką i nie będzie zanieczyszczony. Głównie z powodu podciśnienia przepływu powietrza wytwarzanego przez krawędź „L” pokrywy, do kurzu przymocowane są mikroorganizmy, a pył przenoszony przez przepływ powietrza nie może przejść przez krawędź pokrywy, która wytwarza podciśnienie. Efekt wentylacji odbywa się tylko poprzez dyfuzję powietrza i nie będzie wytwarzany przepływ powietrza, więc tylko oddychał i nie przeniknie bakterii.

zapytać:
Za pomocą 24-studzienkowej płyty istnieją operacje w niektórych studzienkach (w ultra czyszczącej ławce), a w innych studzienkach można hodować komórki. Martwię się, że spowoduje to zanieczyszczenie. Nie wiem na co zwrócić uwagę?

odpowiedź:
Jeśli operacja jest znormalizowana w ultra czyszczącej ławce, powinno być w porządku. Myślę, że możesz w pełni wykorzystać osłonę płyty kulturowej, spróbować wystawić tylko otwory do obsługi i pokryć pozostałe otwory okładkami.
Rozważ kompleksowo przed użyciem i w pełni wykorzystać wszystkie otwory; Jeśli chcesz użyć tylko kilku otworów, możesz użyć tylko jednej strony, a resztę pokrycie osłoną. Jestem przyzwyczajony do najpierw używania prawego otworu (wygodne jest dodanie próbek do prawej ręki).

Podczas pracy użyj kilku szklanych slajdów, aby podnieść jedną stronę płyty, nie otwieraj całkowicie pokrywy, ogólnie nie ma problemu.
Nierównomierny rozkład komórek i rozwiązania

zapytać:
Komórki są zaszczepione na płycie hodowlanej, a komórki zawsze gromadzą się w części peryferyjnej, jak sobie z tym poradzić?

odpowiedź:
Czy mogę zapytać, w jaki sposób twoje komórki są mieszane? Czy to pipetowanie czy wstrząsanie płytą hodowlaną? Jeśli jest to ten ostatni, a jeśli zostanie wstrząśnięty w okręgu, jest bardzo prawdopodobne, że komórki zostaną wrzucone do części obwodowej z powodu siły odśrodkowej, co powoduje mniej komórek pośrodku. Ponad cztery tygodnie!
Oto dobry sposób: przed kultywowaniem płyty nasiennej umieść płytkę hodowlaną do inkubatora na kilka godzin nasycenia, a następnie wyjmij ją. Siła powinna być lekka podczas sadzenia komórek. Dodanie powoli pozwala zawiesić komórek do napływu do studzienek płyty, a hodowane komórki zasadniczo rosną równomiernie. Pamiętaj, aby nigdy nie trzęsić się z wytrząsarką, albo twoje komórki zlecą się razem, jak powiedziałeś.
Im mniejsza średnica otworu płyty hodowlanej, tym bardziej oczywiste jest to zjawisko. Zjawisko to jest nieuniknione dla płyt 24 i 96-studzienkowych, ponieważ ciecz przylega do ściany, tak że roztwór hodowli w studni nie tworzy poziomu płynnego, ale peryferia jest wysoka, podobnie jak zwierciadło. Jednak przy użyciu tych dwóch rodzajów płyt kryzowych nie jest możliwe dodanie wystarczającej ilości roztworu hodowli ze względu na potrzebę dodatkowej interwencji, aby komórki pojawiły się „zbiór krawędzi” wraz z rozwiązaniem hodowli. To zależy od wskaźników, które musisz zaobserwować. Jeśli jest to MTT, immunohistochemia wpłynie na wyniki z powodu warstw komórek.
Podczas trawienia komórek zwróć uwagę na równomierne pipetowanie, aby uniknąć kępek komórkowych, a ilość roztworu hodowli w studni powinna być wystarczająca. Zasadniczo dodaj wystarczającą ilość rozwiązania hodowli podczas zaszczepienia i zmień rozwiązanie raz przy dodawaniu interwencji. Ilość roztworu hodowli dodanego do rozwiązania interwencyjnego jest równa ilości roztworu hodowli w momencie zaszczepienia, w tym przypadku zjawisko „zestawu krawędzi” zostanie ulepszone, więc równie dobrze możesz spróbować.

zapytać:
To, co zrobiłem, to eksperyment z tworzeniem płytki. Najlepiej rozprzestrzeniać komórki w jednolitych warstwach. Większość otworów jest w porządku, gdy wirus jest zaszczepiony, a niektóre z nich nie są jednolite. Istnieją duże różnice w grupie komórkowej. Chciałbym zapytać, jakiej metody używasz podczas dodawania komórek?

odpowiedź:
Kluczowe jest to pipetę komórek w zawiesinę jednokomórkową po trawieniu! Upewnij się, że liczba komórek w każdej studzience jest spójna podczas podziału płyty!
Oczywiście istnieją również czynniki przetwarzania. Bardzo ważna jest również równoległość między studzienkami. Na przykład przy dodaniu medycyny wymieszaj leki po rozcieńczeniu, aby zapewnić, że stężenie każdej studni jest spójne!
Ponadto, przy dodawaniu komórek i leków, grupa testowa i grupa kontrolna powinny zostać dodane z kolei, aby uniknąć różnicy w gęstości komórek i stężeniu leku spowodowanego sekwencją dodawania próbek!

zapytać:
Dmuchanie jest już jednolite, ale deski, 6 otworów i 24 otwory są zawsze nieco nierówne i nieco skoncentrowane na środku. Ponadto oczywiste jest, że zliczanie jest wykonywane, a po dniu lub dwóch gęstość każdego otworu jest inna, co wpłynie na wykrywanie. Czy jest dobry sposób?

odpowiedź:
Jeśli używasz pipety pasteurowej, nie za każdym razem nie ssaj zbyt mocno, ponieważ komórki w pipecie automatycznie tonie, często liczba komórek w pierwszych kilku otworach jest duża, a zawieszenie komórek jest często jednolite, a ciecz będzie miała płyn Podążaj drogą S-Shape.
Jeśli używasz pipety, końcówki należy przetwarzać i usuwać, aby uniknąć uszkodzenia komórek, aby za każdym razem, gdy płyn jest przyjmowany, odpowiada studni. Dokładniejsze jest dodanie otworu jeden do jednego z końcówką. Ale także zwróć uwagę na mieszanie zawieszenia.

Aby skonfigurować grupę równoległą, n musi być wystarczająco duży (możesz ją obliczyć).

Nie wstrząsaj się po poszycie, ponieważ wstrząsanie spowoduje agregowanie komórek w kierunku centrum. Najlepiej jest raz delektować się.

Porowata płyta hodowli komórkowej Yongyue Medical zawsze uważała kontrolę jakości za życie przedsiębiorstwa i dążył do ciągłego doskonalenia konkurencyjności przedsiębiorczości. Firma zawsze przestrzega ducha przedsiębiorstw przestrzegania przepisów i przepisów, będąc surowym z samodyscypliną, łagodną i odważną do wzięcia odpowiedzialności jako standardu, utrzymania i rozszerzania rynku o doskonałej jakości i doskonałej obsłudze oraz spełnianie tego Potrzeby klientów w największym stopniu. . Win-Win z klientami jest naszym celem rozwoju. Yongyue Medical! Twój zaufany partner. Jesteśmy gotowi szczerze współpracować z tobą, aby stworzyć lepszą przyszłość.